液相色譜法與酶法測(cè)定糖化血紅蛋白的比較

  液相色譜法與酶法測(cè)定糖化血紅蛋白均有較好的精密度，但兩種方法之間存在一定的差異，應(yīng)以液相色譜法作為參考方法，對(duì)酶法的結(jié)果進(jìn)行校準(zhǔn)。 酶是一種專一性強(qiáng)、催化效率高的生物催化劑。利用酶的這些特點(diǎn)來進(jìn)行分析的酶法分析，與其他分析方法相比有許多*的優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)待測(cè)樣品中含有結(jié)構(gòu)和性質(zhì)與待測(cè)物十分相似(如同分異構(gòu)體)的共存物時(shí)，要找到被測(cè)物*的特征性質(zhì)或者要將被測(cè)物分離純化出來，往往非常困難。 酶分析法是一種生物藥物分析方法。酶分析法在生物藥物分析中的應(yīng)用主要有兩個(gè)方面：*，以酶為分析對(duì)象，根據(jù)需要對(duì)生物藥物生產(chǎn)過程中所使用的酶和生物藥物樣品所含的酶進(jìn)行酶的含量或酶活力的測(cè)定，稱為酶分析法；第二，利用酶的特點(diǎn)，以酶作為分析工具或分析試劑，用于測(cè)定生物藥物樣品中用一般化學(xué)方法難于儉測(cè)的物質(zhì)，如底物、輔酶、抑制劑和激動(dòng)劑(活化劑)或輔助因子含量的方法稱為酶法分析。 如果有僅作用于被測(cè)物質(zhì)的酶，利用酶的特異性，不需要分離就能辨別試樣中的被測(cè)組分，從而對(duì)被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。所以，酶法分析常用于復(fù)雜組分中結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)比較相近的同類物質(zhì)的分離簽定和分析，而且樣品一般不需要進(jìn)行很復(fù)雜的預(yù)處理。酶法分析具有特異性強(qiáng)，干擾少，操作簡(jiǎn)便，樣品和試劑用量少，測(cè)定快速，靈敏度高等特點(diǎn)。 由于酶反應(yīng)一般在溫和的條件下進(jìn)行，不需使用強(qiáng)酸強(qiáng)堿，它還是一種無污染或污染很少的分析方法。很多需紅使用氣相色譜儀、高壓液相色譜儀等貴重的大型精密分析儀器才能完成的分析檢驗(yàn)工作，應(yīng)用酶法分析方法即可簡(jiǎn)便快速地進(jìn)行。 液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。 液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn)：高壓、高速、、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣。此外液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)，相互補(bǔ)充。 液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測(cè)池等）中，如果流動(dòng)相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。